Название Доклинические исследования лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, для лечения ожоговых ран
Даты 27.11.2017- 31.10.2019
Руководитель Виноградов Александр Валентинович
Грант Государственная программа РФ «РАЗВИТИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ И МЕДИЦИНСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ»
Результаты:
Разработана технология и лабораторный регламент получения фармацевтической субстанции и лекарственной формы лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, определены оптимальные параметры для синтеза. Разработана технология получения высокочистого нейтрального гидрозоля оксида титана, стабильного не менее двух лет. Разработанный материал был охарактеризован физико-химическими методами, размер синтезированных частиц составил 32 нм, пики ИК-спектра и РФА-спектра исследуемого образца соответствуют пикам образца стандарта, дзета потенциал составил +21-23 мВ. Разработаны методики анализа фармацевтической субстанции и лекарственной формы с помощью метода динамического светорассеяния и оценки электрофоретической подвижности, и проведена их предварительная валидация. Наработаны опытные образцы лекарственной формы, на которые оформлены паспорта и сделаны протоколы анализа, и заложены на хранение для изучения стабильности методом «ускоренного старения».
Исследован механизм действия ЛС. Показано, что наибольший эффект на микроорганизмы может быть достигнут при разбавлении препарата не более, чем 1:1. Также полученные результаты показали, что ЛС вызывает активацию Толл-подобных рецепторов 4 и 6, оказывая как прямое воздействие, так и опосредованное высвобождением бактериального ЛПС в следствии гибели бактерий ̶ было зафиксировано увеличение относительной экспрессии гена TLR4 в 3,5 раза и TLR6 в 4,25 раза по сравнению с контролем.
Проведены исследования специфической фармакологической активности лекар-ственного средства. Показана эффективность препарата, определена эффективная доза ЛС, составившая 2 мл/кг. При применении разработанного ЛС было зафиксировано сни-жение системных реакций, основанных на процессах гиперкатаболизма и гиперактивации симпатоадреналовой системы (снижение потери массы тела через 2 недели после начала эксперимента, по сравнению с группой животных получавших Аргосульфан на 60% меньше), и нарастании местных морфологических пластических эффектов и защитных, бактерицидных функций кожного покрова, а именно в снижении общей микробной обсемененности раны на 39% в сравнении с группой животных получавших Аргосульфан. Проведены исследования фармакокинетики лекарственного средства, анализ фармакокинетических данных показал, что при длительном накожном применении препарат накапливается в области нанесения, а также может попадать в циркуляцию и накапливаться в селезенке и печени, тогда как через почки он не экскретируется. Изучение фармакокинетики препарата при его однократном внутривенном введении крысам показало, что динамика выведения диоксида титана из крови была достаточно медленной, для дозы 0,2 мл/кг основные фармакокинетические константы были следующими: Cмакс =1,44 – 1,40 мкг/мл, Квсасыв-я = 0,13562, Кэлим-ии = 0,00044, Клиренс= 15,372 мл/мин. Изучение фармакокинетики препарата при его однократном накожном нанесении кроликам показало отсутствие диоксида титана в крови. Динамика снижения концентрации диоксида титана в коже с прилежащим мышечным слоем из области аппликации препарата была медленной, фармакоки-нетические параметры были в значительной мере независимыми от нанесенной дозы. Так Кэлим-ии для нанесенных доз в 1 и 0,5 мл/кг составила 0,00006 и 0,00008 соответственно, клиренс препарата составил 0,196 мл/мин и 0,143 мл/мин соответственно.
Проведены исследования острой и подострой токсичности, показана безопасность лекарственного препарата и большая широта терапевтического действия. Показано отсутствие значимого аллергенного, иммунотоксического и мутагенного действия. Разработан проект фармакопейной статьи предприятия на лекарственное средство. Создан проект опытно-промышленного регламента получения лекарственного средства.
В ходе работ была исследована стабильность лекарственного препарата Биотита-нит, предполагаемый срок годности составил 2 года.
На основе полученных в доклинических и химико-фармацевтических исследованиях данных были разработаны проекты брошюры исследователя, протокола клинического исследования препарата для медицинского применения и инструкции по применению лекарственного препарата.